从二氧化碳检测试剂的一次客户反馈说起

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      2017年8月的一天,新健康成工业客户项目组收到一封附有检测数据的电子邮件,邮件是由一位工业客户的质量主管发出的,内容很明确:他认为我们提供的二氧化碳试剂测定其公司自配一级校准品的结果不能满足技术标准的要求,请我们给予说明。

         

      对于质量投诉,新健康成坚持严谨客观的态度,二氧化碳测定试剂是我们自主研发的经过多次改进迭代的产品,在工业客户和医院客户都有良好的口碑。对于这次工业客户的投诉,工业客户项目组第一时间将信息反馈至质量管理部,质量管理部立即就这一问题展开分析、验证。基于对该问题的重视,质量管理部在对该批次二氧化碳测定试剂留样品进行重复检验的同时,将该工业客户历年来所有批次的二氧化碳测定试剂留样品都进行了重复检验,希望通过大量数据的统计分析找到投诉问题的原因。这次 “数据求证”,我们复验了多个批号并进行了近千次测试。     实验结果得出不同批号试剂盒批间差符合质量标准。

      从以上结果得出新健康成二氧化碳试剂盒稳定性良好,批间差异小,各个性能指标都符合要求。我们第一时间将以上数据反馈到客户那里,经客户利用我们提供的校准品进行核对,证明是其自己配制校准品稳定性存在问题,新健康成二氧化碳检测试剂不存在质量问题,且批差间差、稳定性都很好。

      二氧化碳在血液中有三种运输方式,其百分比例随动脉血与静脉血转变而不同。其中70%~80%由红细胞中的碳酸酐酶转化为碳酸氢根离子而存在于血液中[1] ;5%~10%溶解于血清中;其余5%~10%通过氨基甲酸的形式组血红蛋白。二氧化碳是局部血清供应调节的重要因素,如果局部二氧化碳的浓度过高,或致毛细血管舒张而血流增多到达组织。血中的碳酸氢根离子决定了血液PH值。同时人的呼吸频率也会影响二氧化碳在体内的浓度,呼吸浅慢将导致呼吸性酸中毒,反之刚造成呼吸性碱中毒。所以对患者血液中二氧化碳浓度的测定对判断患者体内酸碱平衡,离子浓度水平非常重要,是不可缺少的急诊项目之一。推荐常规测定血中二氧化碳的方法有间接中和滴定法、电极法和酶法。滴定法受黄疸、乳糜、人为操作的影响,误差较大,基本未使用;电极法重复性好、操作简单,但试剂较昂贵;酶法重复性好、操作简单,试剂较适中,九乐棋牌经典版分析仪上最多采用的是二氧化碳酶法进行检测[2]

  目前采用的二氧化碳酶法测定原理主要是:磷酸烯醇式丙酮酸与碳酸氢根离子在PEPC与Mg2+作用下生成草酰乙酸,草酰乙酸与NADH可被MDH氧化生成NAD,通过340nm比色,可计算血清中碳酸氢根离子的浓度[3]

  临床上在使用二氧化碳酶法试剂时遇到的最大问题就是试剂的稳定性并不是很好。原因是在开瓶使用后,由于试剂不断地吸收空气中的二氧化碳,试剂的降解过程更加明显,这样就造成了临床上使用的困难,特别是对于中层或基层医院,他们的试剂使用量不多,不利于该项目的开展。

  新健康成二氧化碳试剂的研发经历了2009年的第一代,从开瓶稳定性第7天到2012年二氧化碳试剂第二代采用了自主研发的缓冲体系,通过上千次实验,上万组数据对比,筛选出HCO3- 稳定剂,并通过了研发第一方评价、质检第二方评价、临床第三方评价,开瓶稳定性超过30为天,已逐步解决这一问题。下面对新健康成第二代二氧化碳试剂基本性能做个简单的介绍。

1.准确度测定 分别测定贝克曼和朗道689UN的质控物,结果均在控。

CO2准确度测定


质控物
BM1
BM2
RD689UN
靶值
12.8
33.2
13.5
测定值
12.9
32.4
12.5
偏差
0.78%
-2.41%
-7.41%
是否在控


2.最低检测限   测定空白点20次,均值为0.4mmol/L,平均偏差为0.26mmol/L,最低检测限为0.37mmol/L符合要求。

3.功能灵敏度检测   功能灵敏度<2.3mmol/L。

4.精密度  批内精密度:测定高值和低值,平行测定20次;天间精密度:连续5天上午和下午分别测定高值和低值,每个点平行测定4次,结果CV均小于5%,符合要求。

批内精密度测定



均值
SD
CV
低值
11.5
0.467
4.05%
高值
31.3
0.802
2.56%


精密天间度测定



均值
SD
CV
低值
11.6
0.50
4.29%
高值
31
0.67
2.14%


 5.稳定性实验  开瓶32天和热破11天试剂空白和校准K值呈下降趋势。质控校准前与校准后均在控。




3d
7d
11d
20d
25d
32d
开瓶
试剂空白
1.3616
1.3859
1.2887
1.2554
1.2206
1.18

K值
-4847
-4847
-4790
-4721
-4705
-4683
热破
试剂空白
1.3836
1.2828
1.1135




K值
-4905
-4766
-4634



  6.线性实验    校准后:y = -0.0021x - 0.0031,R2=0.9957,r=0.0.9978>0.99,符合标准。

  7.干扰实验    抗胆红素干扰能力达48.36mg/dl,抗甘油三酯干扰能力达12mmol/L,抗血红蛋白干扰能力达600mg/dl,抗肝素干扰能力达10KU/L,抗VC干扰能力达10mg/dl,均符合要求。

     健康成二氧化碳测定试剂无论是研发部门第一方评价,还是质量部门的第二方评价,还包括在药检所、终端客户的第三方评价,都一再证明其品质是经得起考验的,特别是在开瓶稳定性方面,是目前市场上性能最优秀的产品之一

[1]谢细娜,陈尤佳等,影响血液二氧化碳测定的不稳定因素探讨[J],现代检验医学杂志2005年9月第20卷第5期,86 .

[2]叶应妩,王毓三,申子瑜金 国临床检验操作规程【M】3版.南京:东南大学出版社,2006:58-73

[3]陈洁,顾国宝,华俊等,液体单试剂酶法测定血清碳酸氢根[J] ,检验医学,2006年第1期,52 -54.